前言
無論原發性腫瘤還是繼發性腫瘤,一旦生長直徑超過1~2 mm,都會有血管生成。這是由于腫瘤細胞自身可分泌多種生長因子,誘導血管生成。多數惡性腫瘤的血管生成密集且生長迅速。因此,血管生成在腫瘤的發展轉移過程中起到重要作用,抑制這一過程將能明顯阻止腫瘤組織的發展和擴散轉移。于是體外的血管生成實驗就能很好的模擬腫瘤的血管發生過程,并且適合研究藥物對這一過程的影響實驗。本實驗以HUVEC細胞為例,介紹這一實驗的詳細過程。
圖1 培養皿底部帶計數格坐標
圖2 培養皿底部計數格的示意圖
步驟:找到感興趣的細胞后,記下細胞的坐標信息(橫坐標是字母,縱坐標是數字),下次再觀察時,根據坐標信息找到細胞的位置,即可繼續觀察同一個細胞。
拓展應用:
1.底部的計數格可直接用于細胞計數,計數細胞無需轉移到計數板了;
圖3 邊長500微米的計數格
圖4 邊長50微米的計數格
2.鎖定感興趣的細胞,直接在培養皿里做免疫熒光實驗
圖5 小鼠免疫熒光染色效果(使用ibidi 35毫米培養皿的實驗效果)
如何選擇不同規格的計數格培養皿/載玻片?
根據實驗目的來!
*指倒置熒光顯微鏡,共聚焦顯微鏡等顯微鏡
**使用玻璃底的產品還可以有配套的蓋子進行DIC活細胞成像